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生物扫描电子显微镜(SEM)

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生物扫描电子显微镜(SEM)

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好评率

仪器型号 HITACHI SU8010;HITACHI SU3500;Zeiss Gemini 300;FEI Nova Nano 450
预约次数 4813次
服务周期 收到样品后平均3.5-12.0工作日完成

项目简介

生物扫描电镜主要利用二次电子成像拍摄材料的表面三维形貌情况,拍摄照片为黑白照片;一般用来观察细胞外表面的变形以及受损情况等,也可以观察材料在细胞表面的分布情况,广泛应用于检测生物样品、非均相有机材料、无机材料等微米、纳米范围内的表面特征。

结果展示

图片1.png
图1. I和II是真菌的菌丝和分生孢子图,III是材料表面大肠杆菌的附着图

样品要求

服务流程:

送样方式:

可接收固定好的细胞/组织样品并附有详细送检要求的送样单

①需要您提供的样品:收集细胞/组织取样(新鲜迅速取材),置于1.5ml离心管内,加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),放置于4℃保存,请不要倒弃固定液,一般固定12h后可寄送(务必采用1.5ml离心管寄送)。

②打印填写完整的预约单、送样单和样品一起寄送。

样品取材及固定常用方法:

细胞类

106以上的细胞,用细胞刮刀刮下来,1500-3000转离心,5-10min,收集细胞于1.5ml或2ml离心管,管底肉眼可见2-3粒大米状样品,如果细胞量很多,把细胞团块用细针尖挑成几个小团块,弃上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,可放置于4°C保存。

组织类

新鲜取材,取材位置准确,组织大小尽量在1-2mm³,离体取材后请尽快投入4℃预冷的固定液中,固定液完全浸没组织,可放置于4°C保存。

细菌类

吸取OD0.5-0.8的培养物,离心后弃培养基,收集菌体沉淀于管底黄豆大小,可以用PBS洗1-2次,齐上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,可放置于4°C保存。

*固定液的量请参考上图,加至箭头所示位置

*如样品取材及固定有疑问请及时与指南针工作人员沟通

服务周期:

一般为样品接收后的2周左右,如遇法定假期需要顺延,具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认,谢谢!

交付内容:

每样提供8张拍摄图片(不提供分析服务),如需照片数量超过8张将产生额外费用;

结果反馈请在测试完成一周内,不建议回收样品,如有需要请提前反馈给指南针工作人员。

 

常见问题

1. 2.5%戊二醛固定液如何配置?

市售25%戊二醛水溶液                10ml

0.2M磷酸盐缓冲液(pH7.0)      50ml

蒸馏水加至                                  100ml

2. 0.2M,pH7.0磷酸缓冲液的配置方法?

A液:Na2HPO4·H2O 31.61g,或者Na2HPO4·7H2O 53.63g,或者Na2HPO4·12H2O 71.64g,加蒸馏水至1000ml

B液:NaH2PO4·H2O 27.6g,或者NaH2PO4·2H2O 31.21g,加蒸馏水至1000ml

0.2M,pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml(合起来是100ml)

3. 为什么要加固定液?

固定液是为了保持细胞、组织的固有形态和结构。

4. 扫描电镜制样流程?

新鲜取材后用2.5%戊二醛固定液固定样本,4℃过夜放置,倒掉2.5%戊二醛固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;小心取出锇酸废液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;用梯度浓度(包括30%,50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理两次,每次20 min。用乙醇与醋酸异戊酯的混合液(V/V=1/1)处理样品30min,再用纯醋酸异戊酯处理样品1h或放置过夜。临界点干燥/冷冻干燥处理。镀膜,观察。处理好的样品在扫描电镜中观察。

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